0102030405
Mannose og Mannitol
2025-03-21
- Fryset?rring, kaldet fryset?rring, er en t?rremetode, der forfryser l?gemiddelopl?sningen, der skal t?rres, til et fast stof og derefter direkte sublimerer vandet fra den frosne tilstand uden at g? gennem den flydende tilstand under lav temperatur og lavt tryk. Fordi hele operationsprocessen er i en lav temperaturtilstand, er denne metode s?rligt velegnet til fremstilling af varmef?lsomme proteinpr?parater. Det fryset?rrede proteinl?gemiddel var l?st som en kage, hvilket ikke kun var befordrende for konservering, men ogs? befordrende for proteinl?gemidlets renatabilitet efter genopl?sning. Det er klart, at fryset?rringsteknologi giver en effektiv fremstillingsmetode til proteinfarmaceutiske pr?parater med ustabile fysiske og kemiske egenskaber. Fryset?rringsprocessen er dog en kompleks faseovergangsproces, og der er mange faktorer, der inducerer proteindenaturering i processen med frysning, fryset?rring, t?rring og opbevaring, s? nogle beskyttelsesmidler bruges ofte til at stabilisere proteinet i recepten. Sukker, det mest almindeligt anvendte hj?lpestof i fryset?rrede produkter, hydroxylgruppen i dens struktur kan erstatte hydrogenbindingen mellem protein og vand for at give en stabil effekt, er en ikke-specifik stabilisator af protein og kan spille en vis beskyttende rolle i de forskellige faser af fryset?rring (s?som frysning, fryse-t? og sublimationst?rring osv.). Sukkerets beskyttende virkning er relateret til typen af ??protein og disaccharider, og disaccharider er de mest unders?gte og anerkendte mest effektive beskyttelsesmidler. Saccharose er et disaccharid sammensat af et molekyle glucose og et molekyle fructose, som er kemisk stabilt og for det meste har en amorf struktur, og spiller en v?sentlig rolle i at forhindre den sekund?re struktur?ndring af proteiner, og forl?ngelsen og aggregeringen af ??proteiner under fryset?rring og opbevaring. Sammenlignet med saccharose har trehalose h?jere glasovergangstemperatur, lavere fugtinduktion og mindre reducerbarhed. Disse fordele indikerer, at trehalose kan have et bredere anvendelsesperspektiv. Alkoholer, s?som mannitol, bruges almindeligvis som fyldstoffer, der krystalliserer ved langsom frysning for at give en st?ttestruktur for den aktive komponent og ikke reagerer med den.Mannose er et monosaccharid, opl?seligt i vand, let opl?seligt i ethanol. Farvel?st eller hvidt krystallinsk pulver. Det spiller en vigtig rolle i menneskelig metabolisme, is?r i glycosyleringsprocessen af ??specifikke proteiner. Det er sv?rt for mannose at blive absorberet af den menneskelige krop, og det vil blive udskilt af menneskekroppen kort efter indtagelse, hovedsageligt gennem nyremetabolisme, og den samlede metaboliske cyklus er omkring otte timer. Indtagelse af mannose for?rsager ikke en stigning i blodsukkeret, s? det er en type sukker, som nogle mennesker med diabetes kan spise. I naturen findes mannose i en fri tilstand i nogle frugter, s?som traneb?r, ?bler, appelsiner osv. I menneskekroppen er mannose fordelt i alt v?v og blod, inklusive hud, organer og nerver. I disse v?v er mannose involveret i syntesen af ??glycoproteiner, der regulerer autoimmunsystemets funktion. Tidligere kliniske unders?gelser har vist, at mannose kan behandle og forebygge urinvejsinfektioner, s? nogle udenlandske sundhedsprodukter med mannose som hovedkomponent bruges til at opretholde urinsystemets sundhed. Mannitol er en sukkeralkohol, normalt reduceret fra sukker (mannose), er en isomer af sorbitol, opl?selig i vand, hvidt krystallinsk pulver, har en s?d smag, der ligner saccharose. Mannitol kan bruges ikke kun som et fremragende skeletmiddel, men ogs? som en fryset?rret proteinbeskytter i nogle recepter. Mannitols beskyttende virkning p? protein er relateret til dets koncentration og morfologiske struktur, og dets koncentration er nogle gange relateret til krystalmorfologi. Det antages generelt, at amorf mannitol har funktionen at stabilisere protein, mens krystalliseret mannitol mister sin beskyttende funktion. Mannitolkoncentrationer p? 1 % eller mindre forhindrer aggregeringen af ??proteinl?gemidler gennem dannelsen af ??amorfe strukturer, men h?je koncentrationer af mannitol har en tendens til at krystallisere og fremme aggregeringen af ??proteinl?gemidler. For de fleste proteiner er konservering ved 4°C kun kortvarig (ca. 1 uge) efter resuspendering. Til langtidsopbevaring anbefales det at forberede fortyndingsmidler (som skal indeholde b?rerproteiner, s?som 0,1 % BSA, 5 % HSA eller 10 % FBS) og derefter underpakke frosset ved -20 ℃ eller -80 ℃. Det er vigtigt at undg? gentagen frysning og opt?ning, da hver frysning og opt?ning vil for?rsage delvis inaktivering af proteinet. Trehalose og mannitol suppleres s?dvanligvis med 8 % (volumenprocent) som lyofiliserede beskyttelsesmidler. Trehalose kan naturligvis forhindre den sekund?re struktur?ndring af protein og str?kningen og aggregeringen af ??protein under fryset?rring. Mannitol er ogs? et udbredt fryset?rret beskyttelsesmiddel og fyldstof, der kan reducere ophobningen af ??visse proteiner efter fryset?rring. Fyldstoffet kan tilvejebringe den passende struktur til den fryset?rrede kage, bidrage til den korrekte form af den fryset?rrede kageblok og danne porestrukturen. Por?sitet er en foruds?tning for sublimering af frossent vand, og st?rre porer kan sublimere hurtigere, s? den prim?re t?rretid kan reduceres. Tils?tningen af ??fyldstoffer muligg?r en kortere prim?r t?rretid (produkttemperatur Tp?Tg' eller Tc) og kan bruges som en m?de at optimere den biofarmaceutiske lyofiliseringsproces. Normalt b?r forholdet mellem stabilisator og fyldstof v?re mindst 1:2 for at tilvejebringe den n?dvendige krystallisation af fyldstof. Det resulterende gitter giver mekanisk st?tte til komponenterne i deres amorfe tilstand. Over Tg'en er den amorfe tilstand dannet af pr?parationssystemet ikke stiv nok til at underst?tte sin egen v?gt og vil kollapse p? krystalnetv?rket. Takket v?re mekanisk st?tte kan kollaps forhindres p? trods af t?rretemperaturer h?jere end Tg' (eller endda Tc). I formuleringer med proteinkoncentrationer